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速看！水產(chǎn)品中阿苯達(dá)唑及其代謝物殘留量測(cè)定的前處理方法

點(diǎn)擊次數(shù)：2548 更新時(shí)間2021-06-09 【關(guān)閉】

阿苯達(dá)唑的危害及檢測(cè)目的

阿苯達(dá)唑（ABZ）又名丙硫咪唑，是苯并咪唑類驅(qū)蟲藥物，因其治療效果好、毒性小等方面的優(yōu)勢(shì)，被廣泛用于治療動(dòng)物的腸道寄生蟲感染病，是目前獸醫(yī)臨床使用*泛藥物之一。阿苯達(dá)唑進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后會(huì)快速代謝為阿苯達(dá)唑亞砜（ABZSO），阿苯達(dá)唑亞砜進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為阿苯達(dá)唑砜（ABZSO2），最終代謝為2-氨基阿苯達(dá)唑砜（ABZSO2-2-NH2）。因此，為監(jiān)控阿苯達(dá)唑藥物的使用情況，保障動(dòng)物源性食品的安全，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最大殘留*》中明確規(guī)定了阿苯達(dá)唑在所有食品動(dòng)物靶組織中的殘留標(biāo)志物及殘留*。

本文闡述了如何將阿苯達(dá)唑及其代謝物從樣品基質(zhì)中分離提取出來，并經(jīng)過凈化后，轉(zhuǎn)化成高效液相色譜儀可以檢測(cè)的形式。以提取、凈化為重點(diǎn)，依據(jù)國(guó)標(biāo)GB 29687-2013，為檢測(cè)人員和相關(guān)領(lǐng)域研究人員提供一定的參考。

檢測(cè)項(xiàng)目：阿苯達(dá)唑、阿苯達(dá)唑亞砜、阿苯達(dá)唑砜、2-氨基阿苯達(dá)唑砜

應(yīng)用范圍：水產(chǎn)品（蝦、蟹、魚）

高效液相色譜法

方法原理：試料中殘留的阿苯達(dá)唑及代謝物，用乙酸乙酯提取，正己烷除脂，乙酸乙酯反萃取，高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量。

前處理儀器：

分析天平（感量0.01 g 和0.00001 g）；均質(zhì)機(jī)；離心機(jī)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；氮吹儀；梨形瓶（100mL）；濾膜（有機(jī)相0.45 μm）。

檢測(cè)儀器：HPLC-FLD

試樣的制備與保存

取適量新鮮或冷凍的魚，去鱗、去皮，沿脊背取肌肉；蝦，去頭、去殼，取肌肉部分。絞碎，并使均質(zhì)。

取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試試料。

取均質(zhì)后的空白樣品，作為空白試料。

取均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，作為空白添加試料。

試料于零下20 ℃ 以下保存。

前處理方法

1.蝦、蟹類

提取：稱取試料2 g±0.02 g，于50 mL離心管中，加乙酸乙酯15 mL，均質(zhì)30 s，振蕩5 min，4000 r/min離心10 min，取上清液于100 mL梨形瓶中，殘?jiān)鼈溆谩Ａ砣∫?0 mL離心管，加乙酸乙酯15 mL，清洗均質(zhì)機(jī)30 s，洗滌液于殘?jiān)?，振?/span>5 min，4000 r/min離心10 min，上清液合并至100 mL梨形瓶中，于35 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用20 %甲醇溶液1.0 mL溶解殘?jiān)?/span>

除脂：將上述溶液移入10 mL離心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1 mL，洗滌，正己烷轉(zhuǎn)入離心管中，振蕩1 min，4000 r/min離心5 min，棄正己烷層液，再加入正己烷1 mL，重復(fù)操作兩次，取下層液備用。

凈化：備用液中加0.04 mol/L磷酸1 mL，混勻，加二氯甲烷1.5 mL，混合1 min，4000 r/min離心5 min，取二氯甲烷液于10 mL離心管中，再加二氯甲烷1.5 mL，重復(fù)提取兩次，合并三次二氯甲烷液于10 mL離心管中，于35 ℃氮?dú)獯蹈?/span>；用0.02 mol/L磷酸氫二鈉溶液1.0 mL溶解殘余物，加乙酸乙酯2 mL，混合1 min，4000 r/min離心5 min，將乙酸乙酯液移入另一10 mL離心管中，再向磷酸氫二鈉溶液中加乙酸乙酯2 mL，重復(fù)提取兩次，合并三次乙酸乙酯液，于40 ℃氮?dú)獯蹈?/span>，用20 %甲醇-水1.0 mL溶解殘留物，濾膜過濾，供液相色譜測(cè)定。

2.魚類

提取：稱取試料2 g±0.02 g，于50 mL離心管中，加乙酸乙酯15 mL，均質(zhì)30 s，振蕩5 min，4000 r/min離心10 min，取上清液于100 mL梨形瓶中，殘?jiān)鼈溆谩Ａ砣∫?0 mL離心管，加乙酸乙酯15 mL，清洗均質(zhì)機(jī)30 s，將此液倒入上述殘?jiān)姓袷幪崛?/span>5 min，4000 r/min離心10 min，上清液合并至100 mL梨形瓶中，于35 ℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，加入20 %甲醇溶液1.0 mL溶解殘?jiān)?/span>

除脂：將上述溶液移入10 mL離心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1 mL，洗滌，正己烷轉(zhuǎn)入離心管中，振蕩1 min，4000 r/min離心5 min，去除正己烷層，再加入正己烷1 mL，依法重復(fù)操作兩次。下層溶液過0.45 μm有機(jī)相濾膜，供液相色譜測(cè)定。